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DNA测序技术简介
2016/7/1 13:44:44 浏览量(2354)经过几十年的发展,DNA 测序技术取得了令人瞩目的成就,主要可以划分为三代测序技术。1977年,Sanger等提出双脱氧链末端终止法的DNA测序技术,又称Sanger法测序 。作为第一代测序技术,这种方法依赖放射性同位素标记来实现,操作繁琐,未能实现自动化,不能够满足大规模测序的要求。20世纪80年代末,荧光标记逐渐取代同位素标记,可以通过分析荧光信号来确定DNA序列。由于该类测序法仍然依赖凝胶电泳分离技术,其分析速率、并行化程度以及测序成本很难进一步改善。与Sanger测序法相比,第二代测序技术不需要电泳设备,操作简便,成本低廉,集成化、自动化程度高,能够实现高通量测序,为以后大规模平行测序的平台奠定了技术基础。目前已取得了广泛的应用,但由于其测序过程是基于PCR扩增技术,在读长、成本和准确性等方面也不够理想。第三代测序技术在测序读长这一方面在很大程度上优于第二代测序技术,而且还具有高通量、低成本、耗时短等优点,但其技术缺陷是会出现插入和缺失错误,并行化的问题也有待解决。目前,第三代测序技术处于初步发展阶段,仍有待创新和完善。
参考文献:Progress in chemistry,2016,28(1);58-66
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