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推荐系列 | 组织蛋白酶 B 特异性底物:从菌落初筛到精确定量的完整方案

2026/4/30 9:02:39 浏览量(5)
组织蛋白酶 B底物

Z-Arg-Arg-4MβNA


从“肉眼观察”到“精确定量”:组织蛋白酶 B 检测的两难。

在组织蛋白酶 B(Cathepsin B)相关研究中,实验室常面临这样的矛盾:

菌株筛选阶段需要从上百个菌落中快速挑出阳性克隆,若直接使用仪器检测,前处理繁琐且成本高,效率受限。

酶活测定阶段简单的定性观察无法量化,难以用于动力学数据分析。

单一底物无法同时满足“快速筛选”与“精确定量”的需求。

系列化底物:让检测方法匹配实验目的

金赛途生物的Z-Arg-Arg 底物系列提供了完整的解决方案,我们围绕核心二肽识别序列(Z-Arg-Arg),设计了搭载不同信号报告基团的系列底物,让用户可以根据实验阶段和分析平台,精准选取最适配的工具:

显色直观:萘胺类底物肉眼可判,适合高通量初筛;

定量精准:比色/荧光底物可仪器读数,满足酶学研究;

应用灵活:分阶段选型,从粗筛到精测一站式覆盖;

一、技术原理

从“无色”到“信号释放”:组织蛋白酶 B底物检测的核心逻辑:

1. 特异性识别:组织蛋白酶 B选择性剪切底物中的Z-Arg-Arg二肽序列。

2. 水解切割:酶切位点位于二肽与信号报告基团之间。

3. 信号释放:被切下的信号基团(pNA、AMC、4MβNA或βNA)从底物结合态转变为游离态。

4. 信号输出:游离基团产生特征性颜色或荧光,信号强度与酶活性成正比。

在整个系列中,唯一的变量是所释放的信号报告基团。正是这一差异,影响了底物在不同应用中的灵敏度、与仪器的适配性,以及其最终用途,确保了每个产品能够根据实验需求提供最佳性能。



二、产品列表

1. 显色型底物:肉眼可见的快速筛选工具(偶联显色)

代表产品

Z-Arg-Arg-4MβNA (CAS: 100900-19-4)

Z-Arg-Arg-4MβNA 100900-19-4结构式

中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸- 4-甲氧基-β-萘胺 醋酸盐

英文名:Z-Arg-Arg 4-methoxy-β-naphthylamide acetate salt

简  称:Z-Arg-Arg-4MβNA acetate salt

CAS号:100900-19-4

分子式:C37H53N9O11

分子量:799.88

规  格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)

形  态:类白色结晶粉末

货  号:G04030009

库  存:准现货

显  色:品红色

应用场景

• 工程菌株初筛:平板培养后偶联显色,肉眼快速识别高表达克隆。

• 阳性验证:无需仪器设备,肉眼即可判断酶活性。

• 高通量筛选:适合需要同时处理大量样本的场景。

优势

• 无需仪器:显色反应肉眼可判,降低设备依赖。

• 经济高效:适合大规模初筛,单次检测成本低。

• 高通量友好:可在培养皿中直接观察数百个菌落。

其他显色型产品:

• Z-Arg-Arg-βNA Acetate (CAS: 2237216-27-0)



2. 比色型底物:可直接定量的标准方案

代表产品:

Z-Arg-Arg-pNA ∙ 2HCl (CAS: 201807-90-1)

Z-Arg-Arg-pNA 201807-90-1结构式

中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸-对硝基苯胺 二盐酸盐

英文名:Z-Arg-Arg p-nitroanilide dihydrochloride

简  称:Z-Arg-Arg-pNA ∙ 2HCl

CAS号:201807-90-1

分子式:C26H38Cl2N10O6

分子量:657.55

规  格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)

形  态:类白色结晶粉末

货  号:G04030044

库  存:准现货

显  色:黄色

应用场景

• 酶活力测定:通过吸光度值精确计算酶活单位。

• 发酵工艺优化:定量比较不同条件下的酶产量。

• 动力学研究:测定酶促反应的 Km、Vmax 等参数。

优势

• 精准定量:游离 pNA 在 405 nm 处直接产生吸收峰,无需二次显色,吸光度与酶活呈线性关系。

• 重复性好:适合标准化操作,批间数据可比性强。



3. 荧光型底物:高灵敏度研究级选择

代表产品:

Z-Arg-Arg-AMC (CAS: 136132-67-7)

Z-Arg-Arg-AMC 136132-67-7结构式

中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素 盐酸盐

英文名:Z-Arg-Arg 7-amino-4-methylcoumarin hydrochloride

简  称:Z-Arg-Arg-AMC ∙ HCl

CAS号:136132-67-7

分子式:C30H40ClN9O6

分子量:658.16

规  格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)

形  态:类白色结晶粉末

货  号:G04030043

库  存:准现货

荧  光:蓝色

应用场景

• 微量样本检测:适合样本量有限的实验。

• 酶动力学研究:实时监测反应进程,获取精确的动力学参数。

• 高灵敏定量:检测 pmol 级别的酶活。

优势

• 实时监测:可连续读数,获取完整反应动力学曲线。

• 高通量适配:兼容 96/384 孔板自动化检测平台。

• 背景干扰小:荧光信号特异性强,假阳性率低。



三、应用场景

• 菌落高通量初筛:首选4MβNA显色底物,平板培养后加入偶联显色剂,实现肉眼快速判读。

• 酶活定量与动力学表征:推荐pNA比色底物,在标准酶标仪上获取可靠的活性数据,精确测定Km及Vmax值。

• 自动化高通量筛选与痕量检测:采用AMC荧光底物,以均相、高敏、低背景特性,在自动化平台上高效筛选先导化合物。



四、核心优势

✅ 覆盖完整实验流程

从初筛到精测,一个系列满足多阶段需求:

• 菌株筛选(显色底物)

• 阳性验证(比色底物)

• 深入研究(荧光底物)

✅ 成本与性能的最优平衡

• 初筛阶段:显色底物成本低,适合大通量。

• 验证阶段:比色底物性价比高,可定量。

• 科研阶段:荧光底物高灵敏,满足精密测定。

✅ 技术参数可靠

• 高特异性:Z-Arg-Arg 序列对组织蛋白酶 B 特异性强。

• 低背景:盐形式纯度高,非特异性水解少。

• 批间稳定:规范化生产,数据重复性好。

✅ 灵活的盐形式选择

• 提供醋酸盐、盐酸盐等不同形式。

• 水溶性好,易于配制储存液。

• 适配不同缓冲体系。




扩展服务

同一识别序列,三重信号选择——从肉眼到仪器的完整底物方案。

如需更多“4-甲氧基-β-萘胺底物”或定制服务,欢迎致电 13302967066!

金赛途生物专注于为基因测序、分子诊断与微生物检测提供可靠的国产化替代方案。

如需血球染料和缓冲盐等相关产品,可以在【迈盛生物官网】查阅完整的产品线与技术规格。


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深圳市金赛途生物科技有限公司

成立于2015年,是一家专注于微生物检测基因测序体外分子诊断等领域生化试剂原料研发、生产和销售的高科技企业。致力于提供高质量的生化试剂原料专业的定制合成服务,产品种类涵盖十余种类别,近千种创新产品。秉持“客户至上、诚信专业”的核心理念,用心服务,满足客户在科研和检测中的多元化需求。

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