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推荐系列 | 组织蛋白酶 B 特异性底物:从菌落初筛到精确定量的完整方案
2026/4/30 9:02:39 浏览量(5)Z-Arg-Arg-4MβNA
从“肉眼观察”到“精确定量”:组织蛋白酶 B 检测的两难。
在组织蛋白酶 B(Cathepsin B)相关研究中,实验室常面临这样的矛盾:
• 菌株筛选阶段:需要从上百个菌落中快速挑出阳性克隆,若直接使用仪器检测,前处理繁琐且成本高,效率受限。
• 酶活测定阶段:简单的定性观察无法量化,难以用于动力学数据分析。
单一底物无法同时满足“快速筛选”与“精确定量”的需求。
系列化底物:让检测方法匹配实验目的:
金赛途生物的Z-Arg-Arg 底物系列提供了完整的解决方案,我们围绕核心二肽识别序列(Z-Arg-Arg),设计了搭载不同信号报告基团的系列底物,让用户可以根据实验阶段和分析平台,精准选取最适配的工具:
显色直观:萘胺类底物肉眼可判,适合高通量初筛;
定量精准:比色/荧光底物可仪器读数,满足酶学研究;
应用灵活:分阶段选型,从粗筛到精测一站式覆盖;
从“无色”到“信号释放”:组织蛋白酶 B底物检测的核心逻辑:
1. 特异性识别:组织蛋白酶 B选择性剪切底物中的Z-Arg-Arg二肽序列。
2. 水解切割:酶切位点位于二肽与信号报告基团之间。
3. 信号释放:被切下的信号基团(pNA、AMC、4MβNA或βNA)从底物结合态转变为游离态。
4. 信号输出:游离基团产生特征性颜色或荧光,信号强度与酶活性成正比。
在整个系列中,唯一的变量是所释放的信号报告基团。正是这一差异,影响了底物在不同应用中的灵敏度、与仪器的适配性,以及其最终用途,确保了每个产品能够根据实验需求提供最佳性能。
1. 显色型底物:肉眼可见的快速筛选工具(偶联显色)
代表产品:
Z-Arg-Arg-4MβNA (CAS: 100900-19-4)
中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸- 4-甲氧基-β-萘胺 醋酸盐
英文名:Z-Arg-Arg 4-methoxy-β-naphthylamide acetate salt
简 称:Z-Arg-Arg-4MβNA acetate salt
CAS号:100900-19-4
分子式:C37H53N9O11
分子量:799.88
规 格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)
形 态:类白色结晶粉末
货 号:G04030009
库 存:准现货
显 色:品红色
应用场景:
• 工程菌株初筛:平板培养后偶联显色,肉眼快速识别高表达克隆。
• 阳性验证:无需仪器设备,肉眼即可判断酶活性。
• 高通量筛选:适合需要同时处理大量样本的场景。
优势:
• 无需仪器:显色反应肉眼可判,降低设备依赖。
• 经济高效:适合大规模初筛,单次检测成本低。
• 高通量友好:可在培养皿中直接观察数百个菌落。
其他显色型产品:
• Z-Arg-Arg-βNA Acetate (CAS: 2237216-27-0)
2. 比色型底物:可直接定量的标准方案
代表产品:
Z-Arg-Arg-pNA ∙ 2HCl (CAS: 201807-90-1)
中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸-对硝基苯胺 二盐酸盐
英文名:Z-Arg-Arg p-nitroanilide dihydrochloride
简 称:Z-Arg-Arg-pNA ∙ 2HCl
CAS号:201807-90-1
分子式:C26H38Cl2N10O6
分子量:657.55
规 格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)
形 态:类白色结晶粉末
货 号:G04030044
库 存:准现货
显 色:黄色
应用场景:
• 酶活力测定:通过吸光度值精确计算酶活单位。
• 发酵工艺优化:定量比较不同条件下的酶产量。
• 动力学研究:测定酶促反应的 Km、Vmax 等参数。
优势:
• 精准定量:游离 pNA 在 405 nm 处直接产生吸收峰,无需二次显色,吸光度与酶活呈线性关系。
• 重复性好:适合标准化操作,批间数据可比性强。
3. 荧光型底物:高灵敏度研究级选择
代表产品:
Z-Arg-Arg-AMC (CAS: 136132-67-7)
中文名:苄氧羰基-精氨酸-精氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素 盐酸盐
英文名:Z-Arg-Arg 7-amino-4-methylcoumarin hydrochloride
简 称:Z-Arg-Arg-AMC ∙ HCl
CAS号:136132-67-7
分子式:C30H40ClN9O6
分子量:658.16
规 格:100 mg / 500 mg / 1 g(支持定制包装)
形 态:类白色结晶粉末
货 号:G04030043
库 存:准现货
荧 光:蓝色
应用场景:
• 微量样本检测:适合样本量有限的实验。
• 酶动力学研究:实时监测反应进程,获取精确的动力学参数。
• 高灵敏定量:检测 pmol 级别的酶活。
优势:
• 实时监测:可连续读数,获取完整反应动力学曲线。
• 高通量适配:兼容 96/384 孔板自动化检测平台。
• 背景干扰小:荧光信号特异性强,假阳性率低。
• 菌落高通量初筛:首选4MβNA显色底物,平板培养后加入偶联显色剂,实现肉眼快速判读。
• 酶活定量与动力学表征:推荐pNA比色底物,在标准酶标仪上获取可靠的活性数据,精确测定Km及Vmax值。
• 自动化高通量筛选与痕量检测:采用AMC荧光底物,以均相、高敏、低背景特性,在自动化平台上高效筛选先导化合物。
✅ 覆盖完整实验流程
从初筛到精测,一个系列满足多阶段需求:
• 菌株筛选(显色底物)
• 阳性验证(比色底物)
• 深入研究(荧光底物)
✅ 成本与性能的最优平衡
• 初筛阶段:显色底物成本低,适合大通量。
• 验证阶段:比色底物性价比高,可定量。
• 科研阶段:荧光底物高灵敏,满足精密测定。
✅ 技术参数可靠
• 高特异性:Z-Arg-Arg 序列对组织蛋白酶 B 特异性强。
• 低背景:盐形式纯度高,非特异性水解少。
• 批间稳定:规范化生产,数据重复性好。
✅ 灵活的盐形式选择
• 提供醋酸盐、盐酸盐等不同形式。
• 水溶性好,易于配制储存液。
• 适配不同缓冲体系。
扩展服务
同一识别序列,三重信号选择——从肉眼到仪器的完整底物方案。
如需更多“4-甲氧基-β-萘胺底物”或定制服务,欢迎致电 13302967066!
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