在DNA测序发展的早期，科学家很快意识到一个问题：如果聚合酶持续延伸 DNA链，测序系统就无法准确判断每一步究竟掺入了哪个碱基。

于是，一个简单而直接的思路诞生了：让DNA链在每次掺入后立即停止。

Sanger测序所使用的ddNTP正是这一思想的经典代表。由于ddNTP缺乏3′-OH，一旦掺入即不可逆地终止延伸。然而，新的问题也随之出现：DNA虽然停下来了，却再也无法继续延伸。

对于需要数百次、数千次循环读取的高通量测序而言，单纯的“终止”远远不够。真正理想的状态应该是：

• 需要时能够精准终止

• 信号读取完成后能够温和恢复

• 恢复延伸后，不影响后续聚合，仍能保持天然DNA结构

于是，“可逆终止子（Reversible Terminator）”开始成为测序化学发展的重要方向。多种3′-OH封闭策略陆续被开发，包括3′-ONH₂、3′-O-Allyl（烯丙基）和 3′-O-Azidomethyl（叠氮甲基）等技术路线。

对于可逆终止子而言，3′封闭基团需要同时满足几个苛刻的要求：能够有效阻断延伸、能够被温和条件去除、不影响聚合酶识别、去保护后无残留地恢复天然 DNA结构。然而，并非所有封闭基团都能兼顾聚合酶识别效率、终止效率、脱保护效率及后续延伸能力。

3′-O-Azidomethyl恰好在这些方面取得了良好的平衡：其叠氮甲基结构体积较小，对聚合酶的识别与掺入影响较小。同时，该保护基能够通过温和的还原条件被高效去除，恢复天然的3′-OH结构，不引入额外连接残基，从而顺利重新启动DNA链延伸。正因如此，3′-O-Azidomethyl已被广泛应用于商业化测序体系，成为可逆终止子设计中的经典方案之一。

中文名：3ʹ-O-叠氮甲基三磷酸脱氧尿苷

英文名：3ʹ-O-Azidomethyl-dUTP

简  称：3ʹ-O-N3-dUTP

CAS号：2400931-67-9

分子式：C10H16N5O14P3

分子量：523.18

规  格：25 ul / 100 ul / 250 ul（支持定制包装）

形  态：水溶液

浓  度：100 mM

货  号：G09020005

为满足测序化学体系开发和核酸标记研究的高标准底物需求，金赛途推出了高品质、高纯度的 3′-O-叠氮甲基-dNTP系列产品。

该系列实现了A、C、G、T、U五种碱基的完整覆盖，便于在统一体系中开展方法开发与性能评估。

1. 3ʹ-O-Azidomethyl dATP（CAS: 1048021-78-8）

2. 3ʹ-O-Azidomethyl-dCTP（CAS: 1048021-94-8）

3. 3ʹ-O-Azidomethyl-dGTP（CAS: 1048022-06-5）

4. 3ʹ-O-Azidomethyl-dTTP（CAS: 1048021-85-7）

5. 3ʹ-O-Azidomethyl-dUTP（CAS: 2400931-67-9）

3′-O-N3-dUTP最大的特点，在于其核糖3′位羟基被叠氮甲基暂时封闭。在聚合酶作用下，该核苷酸仍可被识别并掺入新生DNA链。但由于3′-OH被封闭，DNA链无法继续向下延伸。

此时：

1. 单个碱基完成掺入

2. 系统完成信号采集

3. 去除3′端封闭基团

4. 恢复天然3′-OH

5. 开启下一轮聚合反应

整个过程形成：

掺入 → 终止 → 检测 → 脱保护 → 再延伸

的循环机制。

研究表明，3′-O-Azidomethyl封闭基团可通过TCEP等温和还原条件去除，恢复天然DNA结构，为后续聚合反应提供延伸基础。与许多需要保留连接臂残基的修饰体系相比，该路线脱保护后无残留修饰，避免了在连续测序循环中逐步累积而影响反应效率。

1. NGS可逆终止测序

用于SBS测序体系开发，实现单碱基精确掺入和逐循环测序体系构建，为高通量测序提供底层化学支持。

2. 聚合酶兼容性研究

用于研究聚合酶对可逆终止核苷酸的识别、掺入和延伸能力，可作为新型测序酶开发的底物评估工具，典型用途涵盖：

• 聚合酶筛选

• 酶工程研究

• 底物兼容性评价

• 测序酶优化开发

帮助研发人员评估聚合酶对可逆终止核苷酸的识别和掺入能力。

3. 点击化学标记与探针设计

用于核酸后期修饰与标记，实现高选择性CuAAC反应和功能性探针高效开发，可用于核酸标记、探针构建及相关方法学研究。

✅ 无痕还原，无修饰残留

去保护条件温和不伤链与酶，脱保护后不残留额外修饰结构，避免多轮循环中的修饰累积。

✅ 小分子封闭设计，提高聚合酶兼容性

叠氮甲基结构尺寸较小，有利于聚合酶识别与掺入，可作为高效的可逆终止底物参与测序反应。

✅ 特征性拉曼信号，降低背景干扰

叠氮基团在拉曼光谱中具有特征性信号峰，生物体系无内源性干扰，可实现低背景检测，适配SERS等非荧光测序方案。

✅ 系列齐全，配套供应

国产自研3′-O-N3-dNTP系列，覆盖不同碱基类型，支持现货供应与研发阶段的灵活选型。